Копіювання одного ланцюга, а не двох
Транскрипція — це перший етап експресії генів: клітина копіює послідовність ДНК гена в одноланцеву молекулу повідомляючого РНП (мРНК), яка може покинути ядро та бути перетворена на білок. Фермент РНК-полімераза зв’язується з послідовністю промотора, що знаходиться безпосередньоupstream від гена, локально розгортає подвійну нитку ДНК в невеликий «транскрипційний бульбаш» і читає лише один із двох ланцюгів — шаблонний ланцюг, залишаючи інший, код/сенс-ланцюг, відсунутим і невикористаним для цього гена.
РНК-полімераза рухається вздовж шаблонного ланцюга з 3' → 5' (читаючи його в цьому напрямку), синтезуючи новий РНК-ланцюг з 5' → 3' шляхом додавання одного рибонуклеотиду за раз, кожен з яких обирається через те, що він парує з шаблоном: шаблонний A париться з РНК U, шаблонний T париться з РНК A, шаблонний G париться з РНК C і шаблонний C париться з РНК G. Результатом є мРНК-ланцюг, який є компліментарним шаблону та — критично важливо — має ту ж послідовність, що й код/сенс-ланцюг, крім того, що U замінюється там, де код/сенс-ланцюг має T, оскільки РНК використовує урацил замість тиміну.
template (3'→5'): ...T A C G G C A T T... mRNA (5'→3'): ...A U G C C G U A A... (RNA pol reads template, builds complementary RNA) coding (5'→3'): ...A T G C C G T A A... (same sequence as mRNA, T instead of U)
Три фази: ініціалізація, продовження та завершення
Ініціалізація починається тоді, коли РНК-полімераза, часто за допомогою транскрипційних факторів, які розпізнають специфічні послідовності промоторів (у еукаріотах, зазвичай TATA-ящик приблизно 25–35 пар основ на відстані upstream від стартового сайту), зв’язується з промотором та розкручує ДНК для виявлення шабловної нитки. Продовження – це повторювана основна частина процесу – полімераза рухається вздовж гена, безперервно розкручуючи ДНК попереду себе та намотуючи подвійну спіраль позаду, продовжуючи нарощувати зростаючу РНК-ланцюг приблизно на десятки пар основ за секунду в еукаріотах. Завершення завершує процес, коли полімераза досягає специфічної послідовності термінатора або, у еукаріотів, сигналу поліаденілювання, що змушує полімеразу звільнити завершений РНК-транскрипт та від’єднатися від ДНК.
Кодони: як послідовність пізніше визначатиме амінокислоти
МРНК послідовність зчитується, під час пізнішого процесу трансляції, у вигляді неперервних трибазових груп, що називаються кодонами, кожен з яких визначає одну амінокислоту (або стоп-сигнал) відповідно до генетичного коду — відображення, яке є в основному універсальним для всіх відомих живих організмів, від бактерій до людей, що є сильним свідченням спільного еволюційного походження. Оскільки існує 4³ = 64 можливі кодони, але лише 20 стандартних амінокислот, код є дегенеративним (повторним): більшість амінокислот специфікується кількома кодонами, що забезпечує певну толерантність до мутацій, особливо на третьому ('вхилі') місці кодона, де багато замінок все ще дають ту ж амінокислоту.
Еукаріотична обробка: транскрипт ще не завершено
В еукаріотах сировий транскрипт – пре-мРНК – ще не готовий до перекладу та зазнає подальшої обробки перед тим, як залишається в ядрі. До 5' кінця майже одразу після початку транскрипції додають захисну модифіковану гуанінову нуклеотидну заставку (5’ cap), а до 3' кінця після завершення транскрипції додають полі-А хвіст (до кількох сотень аденінових нуклеотидів); обидва модифікації захищають транскрипт від деградації та сприяють подальшим етапам, включаючи експорт з ядра та ініціацію перекладу. Між ними, сплайсинг видаляє некодовані інтрони та об'єднує кодові ексиони – і оскільки одна пре-мРНК може бути спайована різними способами (альтернативний сплайсинг), один ген може давати кілька різних білкових продуктів залежно від того, які ексиони зберігаються, що є основним джерелом білкової різноманітності за межами кількості сирового гена самої лише.
Bacteria, lacking a nucleus and largely lacking introns in most genes, mostly skip this processing step entirely — their mRNA can begin being translated by ribosomes even while transcription is still in progress.
Frequently asked questions
Чому РНК-полімераза копіює лише одну з двох ДНК-ланцюгів?
Це тому, що лише шаблонна ланцюгова читається для побудови комплементарного та змістовного мРНК; одночасне копіювання обох ланцюгів одного й того ж гена призвело б до утворення двох різних, зазвичай безглуздих РНК-послідовностей. Невикористана ланцюга, яка називається сенсовою або кодуючою, має таку саму послідовність, як і кінцева мРНК, але з U замість T.
Яка різниця між кодоном і парною базою?
Пара баз – це окрема зіставлена пара нуклеотидів (наприклад, A-T або G-C) між двома комплементарними ланцюгами. Кодон – це група з трьох послідовних основ на мРНК, яка читається разом під час трансляції для визначення одного амінокислотного залишку або стоп-сигналу — генетичний код побудований на основі кодонів, а не окремих пар баз.
Чому один і той самий ген може давати різні білки?
Це тому, що еукаріотична пре-мРНК піддається сплайсингу, який видаляє інтрони та об'єднує екзони разом, а одна пре-мРНК може бути спайована різними способами, включаючи або виключаючи певні екзони. Ця альтернативна сплайсинг дозволяє одному генному шаблону утворювати кілька різних кінцевих мРНК та, відповідно, кілька різних білків.
Спробуйте наживо
Усе, що вище, працює прямо у вашому браузері — відкрийте DNA Transcription — RNA Polymerase Animation і змінюйте параметри під час роботи. Нічого не встановлюється, нічого не завантажується на сервер, уся модель живе в одній вкладці.
▶ Відкрити симуляцію DNA Transcription — RNA Polymerase Animation