Потоки роботи
Генерація бібліотек (помилкові ПЛР-реакції, рекомбінація, сатурація мутаціями)
Стратегії відбору та скринінгу
Моделювання взаємозв’язку послідовність–функція та зворотний зв’язок
Стабільність і Активність
Розгляд компромісів та використання методів дослідження для визначення термальної стабільності, експресії та каталітичної ефективності.
Приклади
Приклад: Покращення Активності Ферментів
Виберіть ключові позиції з середовища активного сайту.
Створіть бібліотеки насичення; скринінг за обмеженнями.
Об’єднайте корисні мутації та повторно перевірте.
Часті запитання
Якого розміру повинні бути бібліотеки?
Збалансуйте охоплення та пропускну здатність; надавайте пріоритет інформативним позиціям.
Як проєктувати комбінаторні бібліотеки?
Використовуйте структуру та збереження для визначення позицій; уникайте надмірності.
Як уникнути хибних позитивних результатів?
Включайте контролі та повторюйте вибірки; перевіряйте індивідуально.
Як покращити експресію?
Оптимізуйте кодони, шаперонів та сигнали секреції.
Як передбачити сприятливі мутації?
Використовуйте мовні моделі та спрямовану мутагенез, засновані на структурі.
Як збалансувати активність і стабільність?
Ітеративні цикли з багатоцільовою скринінгом.
Яких хостів використовувати?
Вибирайте на основі потреб післятрансляційного синтезу та пропускної здатності.
Як масштабувати скринінг?
Мікрофлюїдні або системи крапель з флуоресцентним підрахунком.
Як документувати результати?
Відстежуйте варіанти, реагенти та умови з версіонуванням.
Розгляди щодо інтелектуальної власності?
Перевірте можливість використання та ліцензування методів.
Спробуйте наживо
Усе, що вище, працює прямо у вашому браузері — відкрийте Protein Folding Visualiser і змінюйте параметри під час роботи. Нічого не встановлюється, нічого не завантажується на сервер, уся модель живе в одній вкладці.
▶ Відкрити симуляцію Protein Folding Visualiser