Diagnostyka laboratorium chorób pszczół

Dlaczego znaki pola mogą kłamić

Wiele chorób brodawek wywołuje symptomy widoczne i nakładające się. Zsunięte, otwarte pokrywy komów i zaczerwienione, węglowodane szczątki larwalne są klasycznymi znakami amerykańskiego brodawku, ale wcześniejsze lub atypiczne infekcje mogą wyglądać nieco podobnie do europejskiego brodawku, kalkowego brodawku czy nawet prosto z chłodnej pogody. Relatywizacja się na wygląd może prowadzić zarówno do fałszywych alarmów, co może spowodować niewy:animated hives, jak i do przegubu wcześniejszych infekcji, które pozwalają na rozprzestrzenienie rzeczywiście notowalnej choroby przez apiaryę lub okręg przed jej wykryciem.

Dlatego inspektorzy pszczelnic i laboratoria diagnostyczne traktują inspekcję pola jako pierwszy krok w ocenie, a nie końcowy ustalenie. Prosty test polny, tak zwany 'test łańcuszkowy', polegający na wyrywaniu matchka przez szczątki podejrzanych larw, może wspierać początkowe diagnozę amerykańskiego brodawku, ale potwierdzające badanie jest to, co chroni przed drogocennymi fałszywymi diagnozami w obu kierunkach.

Mikroskopia: nadal kluczowy instrument w diagnostyce wielu patogenów

Światłowodowa mikroskopja pozostaje klucznym narzędziem w wykrywaniu wielu istotnych chorób pszczół. Spory gatunku Nosema, czyli zarówno Nosema apis, jak i teraz bardziej szeroko rozmieszczone Nosema ceranae, są rozpoznawane przez zgruzkowanie brzuszy pszczół, badanie otrzeźwionej suspenzji pod mikroskopem kompozycyjnym oraz liczenie charakterystycznych owalnych spor. Ta technika może również dostarczyć ilościowy licznik spor do oceny stopnia infekcji, a nie tylko wynik obecności lub braku spor.

Podobnie rozpoznawane są spory grzybów powodujących choroby szpiku (chalkbrood) i kamienisty szpik (stonebrood), podczas gdy diagnostyka pionków trąciłych wymaga przekrojania trachei piersiowych dorosłych pszczół pod mikroskopem stereo, aby dostrzec pionki lub charakterystyczne śladownictwo i zmiany koloru, jakie zostawiają. Te techniki wymagają małej opieki sprzętowej, ale rzeczywistej, wypróbowanej umiejętności, co jest powodem, dla którego w Wielkiej Brytanii laboratoria regionalne ds. zdrowia pszczół i jednostki aktywności pszczelnicze, a nie pojedyncze hodowle pszczół, wykonują tę pracę.

Molekularne badania wirusów i bakterii w pszczelniach

Wirusy pszczzeli, takie jak wirus przekrzywionych skrzydeł, wirus kellerowskiej komórki królewskiej i wirus chronnej paraliżacji pszczzeli nie wywołują widocznych pod mikroskopem standardowym spor lub struktur diagnostycznych, dlatego ich wykrywanie zależy od metod molekularnych, głównie odwrotnej transkripcji PCR (RT-PCR) lub PCR kwantyfikacyjnej (qPCR), które zwiększają i wykrywają materiał genetyczny patogenu w homogenizowanym próbkach pszczzeli czy larw. Te testy mogą również rozróżnić blisko spokrewnione gatunki bakterii, na przykład odmieniając genotypy ERIC Paenibacillus larvae, przyczynnika choroby szarzycej pchłonki amerykańskiej, co ma znaczenie dla śledzenia źródeł wybuchowych.

Z powodu kosztowności sprzętu i umiejętności związanych z PCR, większość indywidualnych pszczzelni nie wykonuje tych testów na miejscu; praktycznym podejściem w Wielkiej Brytanii jest przesyłanie próbek do Narodowego Oddziału Pszczół lub inspektora pszczelniczego regionowego, którzy mogą zaplanować potwierdzenie laboratoriowe, szczególnie dla przypadków podejrzanych o choroby notoryczne, takich jak szarza chora pchłonka amerykańska czy europejska.

Poprawne zbieranie próbek decyduje o sukcesie wyników

Niezdobrzaona próba może wytworzyć fałszywe ujemne, nawet gdy choroba jest rzeczywiście obecna. W przypadku podejrzanej choroby brodawkowej laboratoria zazwyczaj pragną sekcji gruzy około dziesięciu centymetrów kwadratowych zawierającej widocznie zafundowane komórki, zapakowanej w sposób uniemożliwiający zgniłstwo i, gdzie to możliwe, bez dodatkowego przepastwienia, chyba że protokoł specyficzny wymaga innej procedury. W przypadku chorób dorosłych pszczół, reprezentatywna próba żyjących lub niedawno zmarłych pszczół, idealnie trzydziestu lub więcej, zbierana z wielu obszarów brodawki a nie tylko z wejścia, daje znacznie bardziej wiarygodny obraz niż kilka zmarłych pszczół wzbudzonych ze dna beczki.

Próby szybko się uszkodzają, szczególnie podczas testowania wirusów, więc czas zbierania i przechowywania mają kluczowe znaczenie: utrzymanie próbek chłodnych (nie zamarzniętych, chyba że laboratorium specjalnie je o to poprosi), jasno etykietowanej identyfikatorem kolonii i ogrodzenia oraz szybkie przesłanie wszystko znacząco wpływa na to, czy laboratorium zdoła dostarczyć użyteczny wynik.

Interpreting wyniki i dalsze kroki

Pozytywny rezultat PCR na wirusa nie jest sam w sobie kryzys, ponieważ niskie poziomy wielu wirusów pszczelich są obecne w dużym procentie zwyczajnych gniazd bez wyraźnego chorobowego objawu; decyzja o konieczności interwencji zależy od ilości wirusa, obecności objawów chorych i często współistnienia infekcji Varroa (który przewodniczy i mnoży wiele wirusów). W contras, wyniki bakteryjne związane z chorobą Amerykańskiego gruźliczego owadkowego są traktowane znacznie bardziej strycie ze względu na potencjał trwalego i infekcyjnego rozprzestrzeniania się jej sporek, a potwierdzony pozytywny rezultat w Anglii i Walii prowadzi do reakcji statutarnej z sekcji Choroby i grypy pszczelnych, co zwykle obejmuje zniszczenie gniazda i sprzętu zamiast leczenia.

Dobranie zapisów wraz z sezonem, łączących obserwacje pola z dowolnymi wynikami laboratorium, pomaga pszczelarzowi i inspektorowi lokalnemu budować wyraźniejszą historię chorób dla apiariu, co w konsekwencji ulepsza przyszłe diagnozy pola i zmniejsza częstotliwość potrzeby pełnego testowania laboratorskiego.

Często zadawane pytania

Wypróbuj na żywo

Wszystko powyżej działa bezpośrednio w Twojej przeglądarce — otwórz Laboratory Diagnostics for Honey Bee Disease i zmieniaj parametry podczas działania. Nic nie jest instalowane ani przesyłane na serwer, cały model działa w jednej karcie.